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厌氧菌培养方法

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2024-05-27 【 字体:

细菌可以根据对氧气的需求程度进行分类,可以分为以下几类:

好氧菌

称需氧菌、需氧微生物。在有氧环境中生长繁殖,氧化有机物或无机物的产能代谢过程,以分子氧为最终电子受体,进行有氧呼吸。包括大多数细菌、放线菌和真菌。没有氧就根本不能生长的细菌,称作专性好氧细菌。

微好氧菌

性质:仅能在较低氧分压下正常生活的微生物。正常大气的氧分压为0.2Pa,而微好氧菌仅生活在0.01~0.03Pa下。例如发酵单胞菌属和弯曲杆菌属等。

专性厌氧菌

只能在无氧环境中繁殖的一类细菌。这类细菌缺乏完整的代谢酶体系,其能量代谢以无氧发酵的方式进行。这类细菌不仅不能利用氧气,环境中存在的氧气对其还会造成毒性作用。

耐氧厌氧菌

这类细菌也为厌氧菌,但是其不能利用氧气,在无氧状态下生长好,有氧状态下可以生长但生长状态不良好。

兼性厌氧菌

兼性厌氧菌又称兼嫌气性微生物,兼嫌气菌、兼性好氧菌。在有氧或无氧环境中均能生长繁殖的微生物。可在有氧(O2)或缺氧条件下,可通过不同的氧化方式获得能量,兼有有氧呼吸和无氧发酵两种功能。如酵母菌在有氧环境中进行有氧呼吸,在缺氧条件下发酵葡萄糖生成酒精和二氧化碳。

厌氧菌的培养

要培养厌氧菌,通常需要创造一个无氧的环境。通常有以下这些方法:

厌氧缸法

将接种好细菌的培养基平板放入厌氧缸中,使用物理方法在厌氧缸中制造厌氧环境,进行培养。

厌氧袋法

厌氧袋法即在塑料袋内造成厌氧环境来培养厌氧菌。该方法不需要特殊设备,操作简单,使用方便,不但实验室中可用,而且外出采样,现场接种等也可用。气袋为一透明而密闭的塑料袋,内装有厌氧产气袋(吸收气袋中的氧气并产生二氧化碳,制造厌氧环境)、厌氧指示剂(变色,根据颜色来指示袋内是否已经是厌氧环境)。其操作方法为首先将接种的平板培养基放入袋中,放入厌氧产气袋和指示剂,然后密封袋口。如果指示剂变蓝,说明环境内有氧,变为粉色则说明为无氧环境。

疱肉培养基法

疱肉培养基法是最简单的厌氧培养法之一,无需特殊设备。将疱肉和肉汤装入大试管,在液面加入凡士林封闭,从而造成无氧环境。在使用前最好将装有培养基的试管沸水浴10-20min,以使培养基中溶解的氧释放出来。疱肉培养基适合多种厌氧菌的培养,这种培养基更适合培养梭菌属,如产气荚膜梭菌、生孢梭菌、肉毒梭菌等的活化、增菌培养和保存。

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